常用的灭菌方法验证介绍-辐射灭菌

辐射灭菌 不能使用加热灭菌的医疗设备、药品和对环氧乙烷安全性的顾虑来越多采用辐射灭菌。辐射灭菌的独特性主要是基本能控制被吸收的辐射剂量，也能精确测量。辐射仅导致极小温度上升，但对某些级别和类型的塑料、玻璃有影响。

辐射灭菌应用的两种离子是放射性同位素衰减产生的γ-射线和电子束辐射。无论种方法，都要确定达到无菌保证程度的辐射剂量，以及最小剂量和最大剂量之间对被灭菌制品的性质是可接受的。

对γ-射线辐射过程的确认，包括确认制品材料的耐受性、产品装载形式和完成灭容器的剂量分布（包括确定最小剂量和最大剂量的区域）、计时器设置及要求的灭菌剂量。对于电子辐射，还要确认电压、电流、传输速率和电子束扫描范围的控制。

用y-射线辐照灭菌，要选定一个不破坏成分的有效灭菌剂量，美国药典规定 25kGy 的作为要求无菌的制品的灭菌剂量。由于文明生产极大的降低了初始染菌程度，对器材、药品、最终制剂采用较低一些剂量，一些国家采用20kGy 作为灭菌剂量，其他情况下高剂量是关键。为了确定低照射剂量的有效性，有必要确定制品微生物种群的自然抗辐射强度。必须使用化学剂量表确定产品装载模式和最小最大吸收剂量分布。这类剂量表通常是染色的塑料圆筒、片或方块，显示颜色深浅直接对应于吸收辐射能量大小，并要仔细标定。

确认灭菌过程的吸收剂量，应用生物指示剂短小芽孢杆菌（Bailus pumius，E601）与制品的混合来试验。部分试验循环方法提供的应用数据确定生物指示剂的 D₁₀值，以此用于推算吸收辐射剂量以确认适当的微生物存活率。采用逐步增加辐射剂量来建立一个剂量，使受该剂量照射的样本不灭菌率近似1%。这虽不是最大灭菌剂量，但提供了利用样本不灭菌率1%的产生剂量来推算灭菌剂量，同时也表示残留微生物抗性种群的抗力系数。另一种过程基于不同的确定方法，即始于一个产生低于 50%样本不灭菌率的剂量，在这一剂量下照射足够多的样本后，可获得一系列微生物数段，那么每一个辐射抗力系数就确定了。然后用确定的抗力系数和 50%初始灭菌剂量计算出灭菌剂量。每一种灭菌剂量方法都应有周期的复核过程。

在确定了最小辐射剂量和该剂量的照射结果（用化学或物理计量计）后，灭菌制品才能达到无菌保证的效果（包括使用剂量的确认，生物指示剂和其他方法的使用）。

有文献介绍短小芽孢杆菌（ATCC 14884或 CIP 3.83）用于2 kGy辐射灭菌，其D值约3kKGy，每种指示剂10⁷~10⁸个孢子。