有效应用监测灭菌过程的生物指示菌必须对灭菌制品和其他各组分（材料、包裹）和过度灭菌过程要全面了解。至少对灭菌制品所含微生物型别、数量要有基本数据。
每个载体含有5×105~5×106指示菌株的孢子作为生物指示剂，检测过度灭菌可得表列数据。
表：常用生物指示剂的特性
灭菌方式 | 生物指示剂名称 | D值 | D值选择范围 | 指示菌抵抗力的灭活时限 |
存活时间
| 灭活时间
|
干热 160℃ | 枯草芽孢杆菌 (Bocilus subtilis) | 1.9 |
1.0~3.0 | 4.0~12.0 | 19.0~30.0 |
121℃ | 5.0 | 2.0~15.0 | 8.0~60.0 | 12.0~150.0
|
环氧乙烷 600mg/L 54℃60RH% | 枯草芽孢杆菌 (Baillus subtilis) | 3.0 |
2.6～5.8 | 10.4~23.2 |
26.0~58.0 |
蒸汽 121℃ | 嗜热脂肪杆菌 (Bacillus stearothermophilus) | 1.9 |
1.5~3.0 | 6.0~12.0 | 15.0~30.0 |
注∶表中的时间单位为 min。
表中一种特定孢子的生物指示菌菌落数的范围、D值、存活时间和杀灭时间所提供的范围不同，但与实际的计数结果的孢子数具有一样的相关性。如果使用不确定的孢子数或者不知哪一种灭活方式的生物指示剂，不能推理、推算应用。只有使用者测定的抗力特性和在使用者的灭菌条件下，准确地检查每个载体存活的孢子数才可使用。