常用体外诊断试剂的基本原理
按照检验方法，临床诊断试剂大致可分为临床生化检测试剂、免疫学和血清学检测试剂血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、分子生物学诊断试剂等种类。我们就其中主要的临床生化、免疫学、细胞学和基因诊断试剂的基本原理进行阐述。
B细胞功能的检测 空斑形成细胞( plaque formingcell, PFC) 检测:是体外检测B细胞功能的一种方法。该法最早用于实验动物的PFC测定。是以SRBC作为抗原免疫小鼠，从免疫小鼠脾脏分离淋巴细胞或直接用脾细胞，将其与高浓度SRBC混合于琼脂中，经37℃、5% CO2 温育后，在补体参与下抗体形成细胞周围的SRBC溶解而形成溶血小区，即溶血空斑( plaque)。一个空斑代表一个抗体形成细胞，空斑的数量表示抗体形成细胞的多少。IgM参与本反应，固定补体能力强，可直接激活传统途径，导致SRBC溶解，称直接法。若检测其他类别免疫球蛋白的抗体形成细胞，需在试验系统中加人相应的第二抗体才能使SRBC溶解形成空斑，称间接空斑形成试验。近年来，已应用SPA致敏的SRBC结合抗人球蛋白来检测人的抗体形成细胞，此法称SPA-SRBC溶血空斑试验。在此检测系统中加入抗人lg抗体，能与受检细胞产生的Ig抗体结合成复合物，并通过复合物中抗人lg-Fc段与致敏SRBC结合，激活补体而使SRBC溶解。空斑形成细胞的检测，有助于免疫应答动力学的研究和探讨药物对机体免疫状态的影响，是目前研究B细胞抗体产生功能的重要手段。