常用体外诊断试剂的基本原理

按照检验方法，临床诊断试剂大致可分为临床生化检测试剂、免疫学和血清学检测试剂血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、分子生物学诊断试剂等种类。我们就其中主要的临床生化、免疫学、细胞学和基因诊断试剂的基本原理进行阐述。

免疫比浊分析法（immunonephelometry）在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间后形成抗原抗体复合物，用浊度计测量反应液体的浊度，并由此推算样品中的抗原含量。

免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。当抗体浓度固定

时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。

通过测定反应液的浊度与-一系列标准品对照，即可计算出样品中抗原的含量。抗体(Ab) 与可溶性抗原(Ag) 反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。免疫比浊法测定注意事项：1抗原或抗体最大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差；②应维持反应管中抗体蛋白始终过剩；③易受到血脂的影响。

免疫透射比浊法 抗原抗体结合后，形成免疫复合物，在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时，可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多，光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量呈正比。利用比浊计测定吸光度值，复合物的含量与吸光度值成正比，同样当抗体量一定时，吸光度值也与抗原含量呈正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便，但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度，否则就难以测出。

免疫散射比浊法  一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发生光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小及多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量呈正比，即待测抗原越多，形成的复合物也越多，散射光也越强。散射光的强度还与各种物理因素，如加入抗原或抗体的时间、光源的强弱和波长、测量角度等密切相关。散射比浊法又分为速率散射比浊法和终点散射比浊法。

免疫乳胶比浊法  是将待测物质相对应的抗体包被在直径为15～60nm的乳胶颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而提高实验的敏感性。