常用体外诊断试剂的基本原理
按照检验方法，临床诊断试剂大致可分为临床生化检测试剂、免疫学和血清学检测试剂血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、分子生物学诊断试剂等种类。我们就其中主要的临床生化、免疫学、细胞学和基因诊断试剂的基本原理进行阐述。
免疫诊断试剂
免疫酶技术（ｉｍｍｕｎｏｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ） 最早应用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色，既用标记的抗体与标本中的抗原发生特异性结合，当加入酶的底物时，在酶的作用下经一系列生化反应产生有色物质，借助光镜作出定位判断。目前，应用最广泛的是酶联免疫吸附试验（ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）。该方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学特性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种现色反应可通过酶标仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ＥＬＩＳＡ方法成为一种既特异又敏感的检测方法。该法既可检测抗体，又能测定可容性抗原。ＥＬＩＳＡ常采用的酶为辣根过氧化物酶（ｈｏｒｓａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＨＲＰ），其底物是二氨基联苯胺（ＤＡＢ），底物被分解则呈棕褐色，可目测或借助酶标仪检测。由于酶免疫测定操作简单，利于普及，因此，在免疫标记技术中，该法应用最为广泛；此外，在原有方法基础上加以了改良，使得众多新的、更敏感的方法应运而生。