平板菌落计数法的操作步骤
（1）供试品取样 以无菌操作，按规定称取供试品在定量的稀释剂的适宜容器中。
（2）供试液的制备 固体及半固体供试品∶一般称取10g，置于匀浆杯或适当灭菌容器中，加入100 ml稀释剂，用匀浆仪（3000~5000rpm2~4 min），振荡器或乳钵研磨等方法分散，混匀使成1∶10的均匀供试液。
液体供试品∶一般取10 ml，置灭菌锥形瓶中，加入90ml稀释剂，摇匀，即为1∶10供试液。
（3）供试液的稀释（10 倍递增稀释法） 取2~3支灭菌试管，分别加入9ml灭菌稀释剂。另取1支1ml灭菌吸管吸取1∶10均匀供试液1ml，加入装有9ml灭菌稀释剂的试管中，混匀即1∶100供试液。以此类推，根据供试品污染程度，可稀释至1∶103、或1∶104，一般取1∶10，1∶102，1∶103三级稀释液检验
（4）注平皿 在进行10倍递增稀释的同时，以该稀释级吸管吸取每级稀释液各1ml置每个灭菌平皿中，每稀释级注2~3个平皿。另取1支1ml吸管吸取稀释剂各1ml 注入2个平皿中，作为阴性对照。
（5）倾注培养基 将预先配制好的培养基（营养琼脂）溶化，冷至约 45℃时，倾注上述各个平皿约15 ml，以顺时针或反时针方向快速转动平皿（勿使培养基溢出）使供试液与培养基混匀，放置，待凝。
（6）培养 将已凝固的平板倒置于30~35℃培养箱中，一般培养 48±2h。
（7）菌落计数 将平板置菌落计数器上或从平板的背面直接以肉眼用标记笔点计，以透视光衬以暗色背景，仔细观察，计数。必要时借助于放大镜、菌落计数器和显微镜观察。
细菌菌落形态特征∶常为白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、淡黄色（如培养基中加入0.1%TTC试剂，菌落为红色）。
菌落边缘整齐或不整齐，有放射状、树枝状、锯齿状、卷发状。菌落表面有光滑、粗糙、皱折、突起或扁平。
菌落大小差别很大，同一平板上可出现针尖大小至大于10 mm菌落。外观多样，小而突起或大而扁平，或云雾状，不规则。