（1）在所有操作中均不应大幅度或快速动作，以免搅动空气中尘埃微粒；
（2）使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散；
（3）在近火焰区操作。
（4）使用金属接种器具、用前、用后均需灼烧灭菌。接种用具带有蜡质、油质的培养物时，不应立即在火焰上灼烧，应先在内焰里将油质培养物烘干后再灼烧灭菌，以免外溅污染环境；
（5）在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生气溶胶，造成污染；
（6）应用橡胶乳头套在吸管上端，吸吹供试液或培养液等，切勿用嘴直接吹吸管。
（7）接种时切勿用嘴直接吸吹吸管，接种用过的吸管、注射器等，应及时置入消毒液缸内或消毒桶内灭菌。
（8）用注射器吸取样品、培养物时，注射器内应无空气；装卸针头时应用灭菌的镊子；从密封容器内抽取液体时，应注入无菌空气；带液体的针筒针头应向上倾斜，并用75%无菌乙醇棉球（挤干）保护针头根部；注射时勿用力过猛，以免内容物喷出或针头脱落使溢出液体污染灭菌器材或环境；
（9）在开启菌种管或其他供试品安瓿之前，应用碘酒或75%乙醇棉球消毒容器。刻痕用的砂轮、锯刀也应消毒，截断时要防止污染，安瓿切口过火灭菌。
（10）当灭菌瓶塞或试管塞掉落在工作台上，一般不宜再用，应另换无菌塞，或过火焰处理后再用。
（11）在接种霉菌、放线菌时，应在铺有浸过消毒液的纱布上操作，以防孢子散落传播。