常用体外诊断试剂的基本原理

按照检验方法，临床诊断试剂大致可分为临床生化检测试剂、免疫学和血清学检测试剂血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、分子生物学诊断试剂等种类。我们就其中主要的临床生化、免疫学、细胞学和基因诊断试剂的基本原理进行阐述。

临床血液及体液检验分析仪器  如图7-2-3所示。血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异发展，血细胞分析的技术也从三分群转向五分群，从二维空间进入转向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等。下面重点就五分群血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述。

体积、电导、激光散射法（VCS） 这是血细胞分析仪所采用的金典分析方法，它集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞。然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，是白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变，再应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池（flow-cell）中，接受仪器VCS三种技术的检测。

V代表体积（volume）测量法，是采用金典的库尔特专利技术，用低频电流准确分析细胞体积，体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数，它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。

C代表高频电导性（conductivity）,采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异。细胞膜对高频电流具有传导性，当电流通过细胞时，细胞核的化学组成可使电流的传导性产生变化，其变化量可以反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞，由于它们的细胞核特性不同而在传导性参数上有所区别。

S代表几个散射（scatter）测量技术。采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞，收集细胞在10o ～70o 角度内出现的散射光（MALS）信号。该激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况，提供有关细胞颗粒性的信息，可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的散射光要比颗粒细的散射光更强，因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性，嗜酸性和嗜碱性三种细胞。