常用体外诊断试剂的基本原理
按照检验方法，临床诊断试剂大致可分为临床生化检测试剂、免疫学和血清学检测试剂、血液学及细胞遗传学检测试剂、微生物学检测试剂、体液排泄物及脱落细胞的检测试剂、分子生物学诊断试剂等种类。我们就其中主要的临床生化、免疫学、细胞学和基因诊断试剂的基本原理进行阐述。
比色法 以生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。比色分析对显色反应的基本要求是:反应应具有较高的灵敏度和选择性，反应生成的有色化合物的组成恒定且比较稳定，它和显色剂的颜色差别较大。选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件，是比色分析的关键。常用的比色法有两种:目视比色法和光电比色法，两种方法都是以朗伯-比尔定律(A=
为基础。常用的目视比色法是标准系列法，即用不同量的待测物标准溶液在完全相同的一组比色管中， 先按分析步骤显色，配成颜色逐渐递变的标准色阶。试样溶液也在完全相同的条件下显色，和标准色阶作比较，目视找出色阶最相近的那一份标准，由其中所含标准溶液的量，计算确定试样中待测组分的含量。光电比色法是在光电比色计上测量一系列标准溶液的吸光度，将吸光度对浓度作图，绘制工作曲线，然后根据待测组分溶液的吸光度在工作曲线上在得其浓度或含量。与目视比色法相比，光电比色法消除了主观误差，提高了测量准确度，而且可以通过选择滤光片来消除干扰。从而提高了选择性。但光电比色计采用坞灯光源和滤光片，只适用于可见光谱区和只能得到一定波长范围的复合光，而不是单色光束，有其一定的局限，使它无论在测量的准确度、灵敏度 和应用范围上都不如紫外-可见分光光度法。