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宁夏回族自治区无菌检验员培训内容之“菌落计数”技巧
发布时间:2024-10-13浏览:51

对于宁夏回族自治区无菌检验员培训学员来说,尽管“菌落计数”是个相对基础、相对简单的工作,但是在无菌检验实操工作中仍然有许多技巧和窍门,本文为大家说说“菌落计数”技巧,一起看正文。

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一、宁夏回族自治区无菌检验员培训内容之了解菌落形成单位和活菌数

菌落形成单位CFU(colony forming unit)用来估算固体或液体样品中存活的细菌或真菌细胞数量的单位,通常以CFU/g或CFU/mL的形式表示。 
活菌数用CFU表示,表示在适宜的环境条件下,在固体培养基上生长繁殖所形成的菌落数。

但,菌落形成单位CFU并不等于实际活菌数,而是对活菌数的估值。单菌落有可能由一个菌生长繁殖而成,也可能由多个菌生长繁殖而成,但,我们只计算一个,也认为是一个菌生长繁殖而成。

二、按照什么标准去稀释?

1.参考值

其实,这个是最靠谱的方法,有个参考值就可以直接稀释后涂布。这里的“参考值”有可能是估值,也可能是样品本身标注的值。对于有经验的人,其实有没有参考值,总是能够计数。但,对于新手来说,如果没有,根本无从下手。

2.扩大计数范围

比如,稀释到10-8,感觉稀释倍数差不多,涂布的时候选择10-8,10-7,10-6,每个梯度三个平板。再选择10-9,10-5,10-4,每个梯度一个平板,留个对照。即使菌落数计不出来,也能出个参考值、估测值。

3.巧妙利用光学显微镜

比如,稀释到10-8,感觉稀释倍数差不多,采用单染色法,在显微镜下观察,如果没有观察到菌,稀释倍数往前数;如果能够观察到1~5个菌,就按照这个稀释倍数;如果大于5个菌,继续稀释一个梯度;如果看到一片,你清楚怎么处理。

4.巧妙利用血球计数板

比如,稀释到10-8,感觉稀释倍数差不多,用血球计数板大概看一下菌数,推算菌落总数,看是否符合计数要求。

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